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        菌群移植模型的建立

        相关实验:菌群移植模型实验技术

        最新修订时间:

        简介

        菌群移植模型的建立,是因为无菌小鼠微生物背景非常消晰、干净,没有任何微生物干扰研究,已成为菌群与宿主关系研究不可替代的研究工具。

        材料与仪器

        器材:


        粪便收集器、混匀仪等。


        试剂:


        ①志愿者新鲜粪便;
        ②预还原磷酸盐缓冲液((0.1 mol/L, pH 7.2)。

        步骤

        菌群移植模型的建立的基本过程可分为如下几步:


        A. 收集供体粪便用于粪便悬液制备。根据 Perrin-Guyomard A. 等所描述的条件选择健康志愿者:出生后未服用过抗生素及微生态制剂,从未患腹泻及其他肠道疾病。


        B. 收集志愿者清晨第一次排出的新鲜粪便,在厌氧、无菌条件下称量,以1:9(质量体积比)的比例加入预还原磷酸盐缓冲液(0.1 mol/L, pH 7.2) 稀释液,振荡混匀即获得粪便悬液,立即接种无菌小鼠。用于分子微生态检测的粪便装入离心管,-80 °C保存备用。


        C. 特定疾病患者的样品收集、预处理方式可参照健康志愿者。


        D. 接种的方法除灌胃外,还可以采取灌肠法或皮肤涂抹法。

        注意事项

        菌群移植模型建立后,必须严格按照无菌条件进行动物饲养,并遵循不同菌群结构动物饲养于不同隔离器的原则,同时往往需要检测其菌群结构、验证定植效果。

        来源:丁香实验

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