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        振荡切片

        相关实验:神经生物学基本组织学检测实验

        最新修订时间:

        简介

        研究神经元电生理的基础是要获得到好的活体脑片,因此需要使用到振荡切片技术。

        材料与仪器

        器材:


        ① 震荡切片机等。


        试剂:

        ① 1%~4% 的低熔点琼脂糖;

        ② PBS 或生理盐水。

        步骤

        振荡切片的基本过程可分为如下几步:

        A 包埋。使用 1%~4% 的低熔点琼脂糖,用 PBS 或生理盐水配制,浓度根据组织的硬度来自由选择(脑组织软,浓度低一点;心脏硬,浓度高一点),待琼脂糖降温到 37 ℃ 但未凝固时包埋组织,之后等待凝固。

        B 修块。将包埋块修正成 8~12 mm 边长的长方体,可略大或略小。

        C 固定。用 502 胶水或特制的黏合剂黏合在托上(注意:这里指的不是 PFA 固定,而是将凝胶块固定在托上)。

        D 等固定后(约 5 分钟)在槽里灌 PBS 或生理盐水。

        E 在槽外灌冰水或放冰。

        F 根据实验需要切成 40~400 μm 的任意厚度。

        G 捞片。镊子或毛笔挑取。

        注意事项

        1 振动切片的优势是活体厚片,缺点是需要一定的技术熟练度才能得到比较满意的切片。

        来源:丁香实验

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