• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        小鼠皮肤冷冻包埋实验

        相关实验:小鼠皮肤组织学分析实验

        最新修订时间:

        简介

        对皮肤的冷冻切片进行油红 0 染色可以分析皮脂腺的油脂分泌功能和皮下脂肪层的形态,常用于小鼠皮肤炎症及皮脂腺相关研究。

        材料与仪器

        器材:液氮、铝箔、解剖工具、小鼠等

        试剂:

        ① 多聚甲醛(Sigma-Aldrich)

        ② 冷冻包埋剂

        步骤

        小鼠皮肤冷冻包埋实验的基本过程可分为如下几步:

        A. 对小鼠处以安乐死后,从背部剪下方形皮肤组织,将该皮肤贴到干净的滤纸上,用至少 20 倍体积的 4% 多聚甲醛固定过夜(20 小时,< 24 小时)。注意:把皮肤贴到滤纸上时,用镊子轻轻把皮肤展开,既不要留下皱褶,也不要太用力拉扯而使组织结构变形。

        B. 将固定好的皮肤放入装有蒸馏水的 50 ml 试管中进行清洗,清洗过程中可以将试管放于脱色摇床上,用较低的速度轻轻摇动约 30 分钟。

        C. 将清洗完毕的皮肤放入至少 20 倍皮肤体积的 30% 的蔗糖溶液(溶于 PB)中,放置于 4 ℃,直到组织下沉到管底。

        D. 将铝箔叠成小槽子,加入适量冷冻包埋剂。将皮肤组织从蔗糖溶液中取出,先用包埋剂包裹润湿两遍,以去掉原来的水相,再把组织放入小槽子,调整好方向。

        E. 马上小心地把小槽子的底部浸入预先准备好的液氮中,注意不要使组织的方向改变。等包埋剂凝固后,把组织块保存在 -20 ℃ 或 -80 ℃。切片可用于油红染色或免疫荧光。

        注意事项

        1. 固定液的选择应该根据具体的实验要求确定。多聚甲醛是很常用的固定液,适合进行免疫组化,免疫荧光等方面的实验;如果只是进行形态的观察(HE 染色),可以选用 Bouin 固定液;如果要进行电镜分析的小体积样品,则建议采用戊二醛进行固定。

        2. 当组织在蔗糖溶液中刚沉下时,即可包埋。

        3. 包埋时要用细镊子小心调整包埋方向,以便今后切片能切到完整的毛囊。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序