• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        ELISA法评价肠道免疫功能

        相关实验:肠道免疫评价实验

        最新修订时间:

        简介

        ELISA 法评价肠道免疫功能是通过检测不同炎症蛋白如急性期炎症蛋白 MPO,血清淀粉样蛋白 SAA 或细胞因子如 IL-6,IL-1b 等的表达水平。

        原理

        ELISA 法评价肠道免疫功能基本原理是通过检测不同炎症蛋白如急性期炎症蛋白 MPO,血清淀粉样蛋白 SAA 或细胞因子如 IL-6,IL-1b 等的表达水平。

        材料与仪器

        器材:
        组织匀浆器、酶标板、酶标仪。
        试剂:
        ① 组织裂解液(200 mmol/L NaCl,5 mmol/L EDTA,10 mmol/L Tris,10% glycine,1 mmol/L PMSF,1 mg/ml Leupeptide,28 mg/ml aprotinin;pH7.4);
        ② PBS 缓冲液;
        ③ BCA 蛋白浓度检测试剂。
        ④ ELISA 试剂盒

        步骤

        ELISA 法评价肠道免疫功能的基本过程可分为如下几步,以检测急性期炎症蛋白 MPO 为例:
        A 取出目的肠道组织,在冰冷的 PBS 中纵向剪开,小心洗去腔内的消化液,在平板纸上吸去多余液体。
        B 10 ml 圆底离心管中加入 1~2 ml 组织裂解液和漂洗后的肠组织,在冰浴状态下匀浆 30 秒。
        C 冰上孵育 10 分钟,全部转移 1.5 ml EP 管中,4 ℃ 离心 15 分钟,转速 12000 r/min。
        D 小心分离上清,使用 BCA 法测定蛋白浓度。
        E 测定浓度后的上清分装后 - 80℃ 保存或冰上等待,立刻用于 ELISA 检测。
        F 根据 ELISA 试剂盒配备的标准实验步骤进行 MPO 的水平检测。结果示例如图 8-3-6 所示。ELISA法评价肠道免疫功能

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序