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        CIK 细胞增殖实验

        相关实验:细胞因子依赖的其他免疫细胞增殖实验

        最新修订时间:

        简介

        CIK 细胞是细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK),1991 年 Stanford 大学骨髓 移植中心的 Schmidt-Wolf 等以 IFN-Y、IL-2、CD3- mAb 以及 IL-1 共培养 PBMC,得到了一个有强大抗肿瘤活性的细胞群,命名为细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK),其达到近似疗效所需的细胞数较之 LAK 细胞约小 1—2 个数量级,而且在体内应用时完全无需联合使用重组人 IL-2,因此 CIK 细胞的临床应用前景备受瞩目。

        材料与仪器


        器材:离心机、37℃、5% CO2 恒温培养箱。

        试剂:

        ① RPMI 1640 培养液;

        ② 25mmol/L HEPES ;

        ③ 2mmol/L 左旋谷氨酰胺。

        ④ 100 IU/ml 青霉素

        ⑤ 100 μg/ml 链霉素

        ⑥ 50 μmol/L 2-ME

        ⑦ 1000 IU/ml 重组人 IFN-Y

        ⑧ 500 IU/ml 重组人 IL-2

        ⑨ 50 ng/ml CD3 单克隆抗体

        步骤

        CIK 细胞增殖实验的基本过程可分为如下几步:

        A 以 Ficoll 密度梯度离心方法分离人 PBMC,培养体系包括:RPMI 1640、10% 胎牛血清、25 mmol/L HEPES、2 mmol/L 左旋谷氨酰胺、100 IU/ml 青霉素、100 μg/ml 链霉素和 50 μmol/L 的 2-ME,培养温度为 37℃、5% CO2,初始细胞浓度为 106 个/ml。

        B 首先在培养体系中加入 1000 IU/ml 重组人 IFN-Y,孵育 24 小时后加入 50 ng/ml CD3 单克隆抗体、500 IU/ml 重组人 IL-2,继续孵育,

        C 随后每 3 天更换培养液和 IL-2,2 周后即可得到 CIK 细胞产品,培养体系约在 30 天达到增殖极限。


        来源:丁香实验

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