• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        ​附加方案:用镁沉淀微管蛋白和微管结合蛋白

        相关实验:真核细胞结构组分的差异去垢剂分离实验

        最新修订时间:

        原理

        胞质提取物中的微管蛋白和微管结合蛋白(MAP),可以通过37℃孵育,然后用镁沉淀的方法与其他的胞质成分分离

        材料与仪器

        步骤

        加入0.1mol/L MgCl2,将一管毛地黄皂苷/EDTA提取物(主方案中的CYTO组分)的Mg2+含量调至7〜35mmol/L。37℃孵育样品20〜30min。所使用的毛地黄皂苷/EDTA提取物的体积取决于实验目的。镁的终浓度取决于最初材料的来源。通常,35mmol/L的镁是过多的,多用于以完全回收蛋白为目的的实验。


        ②离心8min沉淀微管蛋白和微管结合蛋白。


        ③转移上清液至一干净的小管中。用咪唑缓冲液(pH7.5)或其他合适的缓冲液洗沉淀,并用细胞骨架溶解缓冲液重悬沉淀,然后测定蛋白浓度和进行电泳分析。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序