原理
酵母细胞的裂解方法有很多种，包括自溶、压力破碎（如French加压罐）、研磨（玻璃珠振荡）和酶裂解（如Zymolase)等。本方案讨论的振荡玻璃珠研磨，是最简便的方法之一。这对于小体积（如＜1mL的）和数升体积都很有效。经相差显微镜检测，细胞破碎率一般＞95%。
材料与仪器
| 试剂、试剂盒 | |
|---|---|
| 仪器、耗材 |
步骤
①在微型离心机上离心3mm，以收集细胞。
②去上清，用PBS重悬细胞，再离心3min。
③去上清，估算细胞沉淀的体积，向细胞沉淀中加人3倍体积的冰浴裂解缓冲
液，悬浮后置于冰上。
④加入等体积的预冷玻璃珠。
⑤剧烈振荡悬浮液30s。
⑥重复步骤⑤，并在相差显微镜下观察，直到大部分酵母细胞被裂解。
⑦4℃条件下在小型离心机中离心悬浮液5min，
⑧小心地倒出上清，并转移到另一管中，置于冰上备用。
注意事项
器材预处理：将玻璃珠在1mol/L的HCl中洗两遍，然后在裂解缓冲液中洗两遍。将洗过的玻璃珠液泡于4℃条件下储存在少量的裂解缓冲液中。
来源：丁香实验
