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        制备支持膜

        相关实验:透射电子显微镜观察前准备实验

        最新修订时间:

        原理

        在进行样品观察时,在载网上还应覆盖一层无结构、均匀的薄膜(支持膜或载膜),否则细小的样品会从载网的孔中漏出去。

        支持膜应对电子透明,其厚度一般应低于 20 nm;在电子束的冲击下,该膜还应有一定的机械强度,能保持结构的稳定,并拥有良好的导热性;此外,支持网在电镜下应无可见的结构,且不与承载的样品发生化学反应,不干扰对样品的观察时其厚度一般为 15 nm 左右。

        因此支持膜可用塑料膜(如火棉胶膜,聚乙烯甲醛膜等),也可以用碳膜或者金属膜(如铍膜等)。常规工作条件下,用塑料膜就可以达到要求。其中火棉胶膜的制备相对容易,但强度不如聚乙烯甲醛膜。

        材料与仪器

        步骤

        1. 火棉胶膜的制备


        1.1 在一干净容器(烧杯、平皿或下带止水夹的瓷漏斗)中放入一定量的无菌水。


        1.2 用无菌滴管吸 2% 火棉胶醋酸戊醋溶液,滴一滴于水面中央,勿振动,待醋酸戊醋蒸发、火棉胶则由于水的张力随即在水面上形成一层薄膜。


        1.3 用镊子将它除掉,再重复一次此操作,主要是为了清除水面上的杂质。


        1.4 然后适量滴一滴火棉胶液于水面,火棉胶液滴加量的多少与形成膜的厚薄有关。


        1.5 待膜形成后,检查膜是否有皱折,如有,则除去一直待膜制好。



        2. 聚乙烯甲醛膜(formvar 膜)的制备


        2.1 洗干净的玻璃板插入 0.3% formvar 溶液中静置片刻(时间视所要求的膜的厚度而定),然后取出稍稍晾干便会在玻璃板上便形成一层薄膜;


        2.2 用锋利的刀片或针头将膜刻一矩形;


        2.3 将玻板轻轻斜插进盛满无菌水的容器中,借助水的表面张力作用使膜与玻片分离并漂浮在水面上。

        注意事项

        所使用的玻片一定要干净,否则膜难以从上面脱落;漂浮膜时,动作要轻,手不能发抖,否则膜将发皱;同时,操作时应注意防风避尘,环境要干燥,所用溶剂也必须有足够的纯度。否则都将对膜的质量产生不良影响。

        来源:丁香实验

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