• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        IrECM三维培养乳腺干细胞

        相关实验:乳腺干细胞的培养实验

        最新修订时间:

        原理




        材料与仪器

        步骤

        (a)在I型胶原包被的培养瓶中用H14培养基培养D920细胞至70%〜80%汇合。


        (b)消化细胞,用DMEM/0.5FB/EDTA重悬至l×107个细胞/ml。


        (c)加人1:50稀释的抗ESA抗体,置冰上孵育30 min。


        (d)用10ml无血清的DMEM洗涤一遍,然后用DMEM/0.5FB/EDTA重悬至1×107个细胞/ml。


        (e)按照制造商推荐的浓度,加人抗鼠IgG磁珠,置冰上孵育30 min。


        (f)用10 ml无血清的DMEM洗涤一遍,然后用DMEM/0.5FB/EDTA重悬至1×107个细胞/ml。


        (g)将细胞悬液加人到合适体积的MACS柱中。


        (h)用3倍细胞悬液体积的DMEN/0.5FB/EDTA培养基洗涤MACS柱。


        (i)从磁铁上取下柱子,用H14培养基洗脱。


        (j)将基底膜基质(Matrigel)置于冰上,在24孔板中每孔加人5μL包被。


        (k)置37℃,10 min使之聚合。


        ⑴与此同时,用300μ1冰浴的Matrigel重悬1×103〜1×104的D920细胞。


        (m)加人到包被的24孔板中,置37℃,10 min使之聚合。


        (n)加入H14培养基,每2天换液。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序