• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        多次分离

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1. 低压下(0.5 lb/in2)用以下溶液冲洗预处理毛细管:

        10 倍柱体积的 0.1 mol/L NaOH

        10 倍柱体积的水

        4 倍柱体积的 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30。

        柱存储于 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30。


        2. 将各 0.2 mg 的 ACTH4-10、血管紧缩素 I 和血管紧缩素 II 溶于 1 ml 0.05 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30(终浓度 = 0.6 mg 多肽/ml)制备多肽混合物。冻存 100 μl 每管混合物于 -20℃。


        3. 在 0.5 lb/in2,10 s 内用低压注射上样 10~20 nl 多肽混合物。


        4. 使用以下条件分离多肽混合物:

        电解质:0.05 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30

        探测波长:200 nm

        温度:25℃

        电压:25 kV

        分部大小:每收集管 3 min


        5. 用一系列的含 10 μl 0.05 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30 的微量锥形瓶替换标准的出口池(正极)。收集 3 min 的组分于每一个瓶子以利于了解分离的长度。


        6. 重复注射和分离(步骤 3~5)4 次,合并来自相应的组分号码的内容物。


        7. 用以前阐述的分析分离法监视多肽内容的组分(见解析多肽分离实验)。

        常见问题

        多次收集方法要有效,多肽的洗脱时间必须具有重复性。以下的方法使用P/ACE5000毛细管电泳仪器进行多肽混合物的分离。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序