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        配制电解质梯度胶实验

        相关实验:配制电解质梯度胶实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        材料

        本方法包括方案 8 中所有物品,加上:
        甲酰胺(100%)

        离子梯度胶用 1XTBE 配制,有无甲酰胺均可。关于含甲酰胺的聚丙烯酰胺凝胶,请见方案 9。

        醋酸钠(3mol/L,PH7.0)

        方法

        1. 依方案 8 步骤 1~8。

        2. 在实验桌的工作区上铺上衬塑料的保护纸。

        3. 参照方案 8 或 9 配制变性聚丙烯酰胺凝胶。

        4. 将胶放在电泳装置中。在上槽中加入 0.5XTBE 缓冲液,在下槽中加入 1 份 3mol/L 醋酸钠和 2 份 1XTBE。按照方案 11 操作。
        电泳时,指示染料的移动逐渐变慢,当溴酚蓝到达底部时,移动几乎停止。一般,继续电泳直到二甲苯蓝离底部只有 5~10 cm 而溴酚蓝到了底部。
        推迟加入 3mol/L 醋酸钠可以调整压缩 DNA 条带的时间。电泳开始时,上下槽都用 1XTBE; 在适当时候,在下槽加入一半体积的 3 醋酸钠。根据经验,这样可以压缩条带的不同区域,读出最多的条带。

        来源:丁香实验

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