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        沉淀 σ32 和 RNA 聚合酶实验

        相关实验:沉淀 σ32 和 RNA 聚合酶实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        材料与设备

        SDS-PAGE 电泳装置

        聚丙烯酰胺小胶(10%)

        试剂

        聚乙烯亚胺(PEI)(6% 储液,pH7.9)

        (配方,见“试剂的配制”,pp.184~189)

        操作程序

        1)0.2%DOC 上清 (见 p.153), 取 6x50-ul 等分试样。各试样分别加入 0、1、2、3、4 和 5ul 6%PEI 储液(使 PEI 浓度分别为 0%、0.12%,0.24%、0.36%、0.48% 和 0,6%), 充分混匀,孵育 5~10 min。

        2) 用微型离心机离心 1ml,离下沉淀物。如需要,取上清样品,供快速蛋白质斑点印迹试验(见 PP.172?173) 或 SDS 凝胶电泳分析用。做斑点印迹试验应立即进行。

        结果

        典型的显示 PEI 滴定实验结果的 SDS 凝胶照片,见图 3-5。

        沉淀 σ32 和 RNA 聚合酶实验

        来源:丁香实验

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