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        电泳

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        一、垂直电泳

        SDS 和常规聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳的方法基本相同。将缓冲液贮液稀释一倍便为连续电泳的电极缓冲液。不连续 SDS 电泳的电极缓冲液常用 Tris-甘氨酸系统(0.025 mol/L Tris,0.192 mol/L 甘氨酸,0.1% SDS,pH 8.3 )。

        二、水平电泳

        和常规聚丙烯酰胺凝胶电泳一样,SDS 水平电泳目前也有三种方式,即经典的搭接滤纸桥的方式和二种半干方式。前者操作麻烦,电泳时间长。半干技术在保证分辨率的前提下,电泳时间只需 1 小时(分离距离 8 cm),且节省材料,操作简便。

        搭滤纸桥的 SDS 水平电泳方法与常规聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法相同。连续和不连续电泳的电极缓冲液和上述的 SDS 垂直电泳相同。电泳可采用恒电流方式,加样时用低电流,以使样品分子可顺利地进入凝胶,见表 5.8。

        电泳

        小孔梯度聚丙烯酰胺凝胶 SDS 电泳的电极缓冲液也为 0.025 mol/L Tris,0.192 mol/L 甘氨酸,0.1% SDS,pH 8.3。电泳条件则常采用恒功率方式,见表 5.9。

        电泳

        来源:丁香实验

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