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        微载体

        相关实验:微载体

        最新修订时间:

        原理

        以高浓度接种细胞和微珠,然后按照要求进行稀释、搅拌和取样。

        材料与仪器

        步骤

        1. 按照所需最终培养液量的 1/3,以 2~3 g/L 混悬微珠。

        2. 用胰蛋白酶消化和计数细胞,以正常接种浓度的 3~5 倍将细胞接种到微珠悬液中。

        3. 以 10~25 rpm 将培养物搅拌 8 h。

        4. 加入培养液,达到 0.7~1 g/L 的微珠浓度的最终容量。

        5. 加快搅拌速度至 60 rpm。

        6. 如果 pH 下降,关闭搅拌器培养 5 min,使微珠沉降下来,然后更换 1/2~2/3 的培养液。

        7. 收集细胞:

        (a)吸出培养液。

        (b)通过沉降法清洗细胞。

        (c)用胰蛋白酶和 EDTA 处理微珠。

        (d)让微珠沉降。

        (e)通过转动使细胞从微珠上脱落下来。

        (f)通过混悬和离心清洗细胞。

        来源:丁香实验

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