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        方案11.14 用大型串联式过滤器灭菌过滤

        相关实验:用大型串联式过滤器灭菌过滤

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1. 安放好过滤架(保护滤器的夹子和夹子架(除非滤器架子有腿))。

        2. 将出口与接受瓶(底部有出口的过滤接受容器)相连。

        3. 将过滤器(如 90 mm 膜和可重复使用的过滤器支架,或一次性碟式过滤器或筒式过滤器)的出口放到合适的高度,使收集培养基的瓶子(培养基瓶,铝箔包裹,干热法灭菌)正好位于过滤器下方,瓶口可被钟罩盖住,并且当装满的时候可以很容易地将瓶子取出。如果需要,可先用一个无菌培养瓶进行调试,但最后不要用这个瓶子收集无菌液。

        4. 将压力瓶与过滤器的入口连接起来。

        5. 将培养基缓慢地倒入压力瓶(5〜50L)中。

        6. 对于可重复使用的过滤器,要将泵(100 kPa (1 bar,15 p. s. i.))打开足够长的时间,使滤器湿润。然后将泵关闭并拧紧过滤架。

        7. 将泵打开调到 100 kPa (15 lb/in2 )。当接受容器(底部有出口的过滤接受容器)快装满时,打开管子(硅树脂耐压管)接到培养基储存瓶中。

        8. 从过滤钟罩下取出瓶子盖好。

        9. 将铝箔重新包在盖子(培养基瓶的盖子,高温高压灭菌)上,包到瓶颈处以保证保存时无尘。

        10. 在瓶子上贴标签,标注日期,签名。

        11. 根据过滤后收集瓶子的大小及数量,在过滤的开始阶段、中段、末段分别从瓶中取样品置于 37°C 孵育一周做污染检测。

        12. 4°C 保存备用。质量控制完成前不要使用。

        来源:丁香实验

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