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        pH标准色阶的制备实验

        相关实验:pH 标准色阶的制备实验

        最新修订时间:

        原理

        酚红是常用的一种指示剂。在pH7.4时,它呈红色;pH7.0时,变成橘红色;pH6.5呈黄色;低于pH6.5时,呈柠檬黄;pH7.6呈桃红色;pH7.8呈紫红色。由于颜色的判断有较高的主观性,制作一个标准色阶是很有用的:可以用灭 菌的平衡盐溶液(BSS)及酚红按常规浓度配制,装在相同的瓶子里,上端剩余的空间也相同,一般在配制培养基时可以使用它。以下方案是以使用25。耐的培养瓶为例。

        材料与仪器

        步骤

        材料

        无菌的

        Hank's平衡盐溶液(HBSS),或Eagle's MEM 10倍浓缩液,不含碳酸盐或葡萄精.含有20mmol/LHEPES 10ml

        超纯水(UPw)90ml

        1mol/L NaOH 10ml

        常用容器,30ml

        培养瓶.25cm2

        加样器吸头,100闪

        非无菌物品

        PH计

        加样器吸头,10~100ul

        操作步骤

        1.配制H冷汽或培养基,pH6.5或稍低于6.5,分装至7个标记好的常用容器中.

        2.使之在空气中平衡30min.

        3.用lmol/LNaOH H将各容器中的液体分别调节至pH6.5、6.8、7.0、7.2、7.4、7.6、7.5,以pH计侧试.

        4.取每种HBSS过滤除菌,收集 5m!分装至标记好的培养瓶内,收集之前先用 5ml冲洗滤器.

        5.将培养瓶盖好.

        来源:丁香实验

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