根际pH的显色测定实验

本方法是利用pH指示剂在不同酸碱度条件下变色的特点，测试根际pH的变化。将pH指示剂加入到具有一定营养条件下的琼脂溶胶中，组成琼脂－指示剂混合液。植物根系可直接利用其作为介质生长。由于根系的吸收和溢泌等生理活动，使根际pH不同于原介质，由此产生不同的显色反应。对照标准pH变色范围，可以确定根际pH上升或下降的幅度及数值。

一、材料和设备

小麦幼苗，直径10 cm 的培养皿，扭力天平，电炉，pH计，50 ml 量筒，100  ml 烧杯，0.5  ml 移液管，玻棒，镊子，洗耳球，吸水滤纸，10×10cm 塑料薄膜，琼脂

50pp M 含NH4+的培养液：（1000  ml H2O+183 M g（NH4）2SO4+136 M gCaSO4）

0．6%溴甲酚紫：0.6克溴甲酚紫用少量95%酒精溶解后，用蒸馏水定溶至100  ml

0.01N NaOH，0.01N HCl

二、实验步骤

1．显色基质的准备：取50  ml 含50pp M  NH4+的培养液，加入0.5克琼脂和0.5  ml  0.6%的溴甲酚紫指示液，在电炉上搅拌加热至沸腾。然后冷至40℃左右时，用稀NaOH或稀HCl调pH至6.0（暗红色）。

2．显色：将琼脂－指示剂混合液倒入培养皿中，使之成为均一的薄层，冷却凝固后备用。取预先培养7－10天的小麦幼苗（根长10cm 左右）1株，用蒸馏水冲洗根系，于塑料薄膜（10×10cm ）上展平，并用吸水纸吸干薄膜和根表的水分，反转贴于已凝固的琼脂－指示剂混合液上，轻压驱除气泡并使根系嵌入凝胶中。室温条件下1小时左右，pH指示剂即显颜色变化。

3．观察现象并解释结果：pH指示剂不同颜色指示出不同根际部位的pH值。观察根系周围琼脂－指示剂混合液的颜色变化，确定根系pH是上升还是下降，说明根系pH值变化的原因。本实际可用标准琼脂－指示剂作对照，确定各根区的pH值，还可用微电极进行精确测定。

1．溴甲酚紫显色范围为pH5.2－6.8（黄－紫），适用于微酸性条件下使用；

甲酚红变色范围为pH7.2－8.8（黄－红），适用于碱性条件下使用。

2．塑料薄膜和根表的水分必须吸干，否则影响显色结果。