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        微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验

        相关实验:微量全血间接荧光染色法流式细胞术样本制备实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1. 取肝素或EDTA抗凝全血(100μl/份),置12×75mm专用塑料试管中。

        2. 加入50μl特异的单克隆抗体(一抗),室温下孵育30min。

        3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞,稳定和固定白细胞。

        4. 离心(800~1000rpm,5min)弃上清液,用PBS洗涤细胞2次。

        5. 加入50μl荧光(FITC或PE)标记的第二抗体,室温下避光染色30min。

        6. 上流式细胞仪检测。

        注意事项

        1. 新鲜全血一般室温下放置8小时以内可以使用,时间过长会使活性降低,影响测定结果。

        2. 抗凝血应保证无血块凝集。

        3. 全血加入试管中时,应尽量避免加到试管壁上,如沾到了管壁上必须用用棉签擦净,否则会影响细胞二维点图的细胞群的分离效果。

        来源:丁香实验

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