材料与仪器
步骤
根据实验方案诱导细胞凋亡，制备单细胞悬液，使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒，通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸（PS）的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。
1． 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×，冰育。
2． 悬浮细胞在低温环境中，用PBS洗涤细胞2次（800～1000rpm离心，5min）。
3． 弃上清，加入490μl预冷的结合缓冲液重悬细胞（细胞浓度为105～106／ml）。
4． 加入5μl Annexin V-FITC和5μl PI于细胞悬浮液中，轻轻混匀。
5． 将试管置于冰上，避光孵育10分钟。
6． 上FCM检测。
1． 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×，冰育。
2． 悬浮细胞在低温环境中，用PBS洗涤细胞2次（800～1000rpm离心，5min）。
3． 弃上清，加入490μl预冷的结合缓冲液重悬细胞（细胞浓度为105～106／ml）。
4． 加入5μl Annexin V-FITC和5μl PI于细胞悬浮液中，轻轻混匀。
5． 将试管置于冰上，避光孵育10分钟。
6． 上FCM检测。
来源：丁香实验
