• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        提高肿瘤细胞培养存活率和生长率的实验

        相关实验:肿瘤细胞培养实验

        最新修订时间:

        原理

        根据人们的经验,肿瘤细胞在体外不易培养,建立能传代的肿瘤细胞系更为困难。

        当肿瘤组织或细胞初代接种培养后,常出现以下几种情况:

        1.  完全无细胞游出或移动;

        2.  有细胞移动和游出,但无细胞增殖,细胞长时间处于停滞状态以致难以传代;

        3.  有细胞增殖,传若干代后停止生长或衰退死亡;

        4.  传数代后细胞增殖缓慢,经过一段停滞期后,才又呈旺盛生长状态,形成稳定生长的肿瘤传代细胞系。

        以上现象说明肿瘤细胞对体外生存条件有较高的要求,并需经过对新环境的适应才能生长,因此欲获得好的培养效果,不能局限于一般培养法,必须采用一些特殊的措施。

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        一、适宜底物

        如:把经过纯化的细胞接种在不同的底物上,如鼠尾胶原底层、饲细胞层等。

        二、生长因子

        应用促细胞生长因子,向培养液中增加一种或几种促细胞生长因子。根据细胞种类不同选用不同的促生长物,常用有胰岛素、氢化可的松、雌激素以及其它生长因子。

        三、动物体媒介培养

        为提高肿瘤细胞对体外培养环境的适应力和增加有活力癌细胞(干细胞)的数量,可采用动物体转嫁接种成瘤后,再从动物体内取出进行培养,能提高体外培养的成功率。受体动物以裸鼠最好。

        1.  瘤块接种

        取新鲜瘤组织,用Hanks液洗净血污,切成1~3 毫米小块,用穿刺
        针头吸一小瘤块,用酒精棉球擦拭动物腋部后,直接刺入皮下,注入瘤块。

        2.  饲养观察,待肿瘤生长达较大体积后,剥取出瘤组织。

        3.  进行体外培养。

        4.  为防止失败,仍取部分瘤组织继续在裸鼠体内传代。通过裸鼠媒介接种,有活力的肿瘤细胞数量增多,细胞培养易于成功。
         
        肿瘤细胞培养方法与培养正常细胞完全相同,但成功率比正常细胞高。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序