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        直接比较法

        相关实验:毒扁豆碱对乙酰胆碱作用的影响实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1.  连接好实验装置,保证实验条件。
         
        2.  记录装置的条件:将台式平衡记录仪量程旋纽置于 5 mv,打开记录笔将笔调到记录 的合适位置。取2 g 砝码悬挂在换能器的小钩上,调节载波放大器的“增益”、“调零”旋 钮,使记录笔上升1大格(25 mm),取下砝码后,记录笔又到原位置(加砝码时调“增益” 旋钮,取下砝码时调“调零”旋钮,需要重复数次即可)。记录速度 8 mm/min。
         
        3.  标本的制备:将蟾蜍破坏大脑与脊髓,背位固定于蛙板上,剪开腹部皮肤,在耻 骨上端以小镊子分别穿线结扎左右腹直肌的肌腱,于结扎的下方剪断肌建,沿腹白线向 上剪开(应注意避免剪断腹壁内侧的腹壁静脉)以分离左右腹直肌,再沿腹直肌外缘向 上剪开,在第二腱划高度分用线结扎两侧腹直肌,并在结扎线上方剪断肌肉。标本制成 后,以 Ringer 氏液洗净,放入置有 Ringer 氏液的烧杯内,备用。
         
        本实验选用蟾蜍腹直肌的理由是因为蟾蜍腹直肌对乙酰胆碱较敏感,药物作用较缓 和、稳定,易于比较收缩的高度。
         
        4.  标本的悬挂:将腹直肌标本一端固定在浴管底部,另一端悬挂于力位移换能制的 小钩上。腹直肌的张力变化通过力位移换能器、载波放大器后,记录在台式平衡记录仪 上。悬挂好标本后, 立即换液1次,再给腹直肌标本加前负荷 2 g(上升1大格、25 mm 即 可),稳定 30 分钟,即可加药。
         
        5.  给药方法:按累积给药法,先观察各浓度乙酰胆碱收缩蟾蜍腹直肌的量效关系, 给药顺序见表 4-8。然后冲洗,先冲洗4-5次,再每隔 10 分钟换液1次,待腹直肌标 本重新恢复至基线(约 40 分钟)后,加入 10-3 mol/L Physosti gmine(毒扁豆碱)0.1 ml,作用 15 分钟后,仍按累积给药法加入各度的乙酰胆碱,观察毒 扁豆碱对乙酰胆碱量效关系的影响,给药顺序见表 4-9。

         
        直接比较法

         
        6.  绘制量效曲线:以乙酰胆碱引起收缩的最大高度为 100%,计算各浓度乙酰胆碱 收缩腹直肌的百分数。计算方法如下:
         

        直接比较法

         
        绘制量效曲线时,以收缩百分数为纵座标,以乙酰胆碱浓度的负对数为横座标,绘 制量效曲线(曲线A:乙酰胆碱收缩蟾蜍腹直肌的量效曲线;曲线B:毒扁豆碱预处理 后乙酰胆碱收缩蟾蜍腹直肌的量效曲线)。

        来源:丁香实验

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