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        拮抗法

        相关实验:pA2 的测定实验

        最新修订时间:

        原理

        在药理学实验中,影响实验结果的因素很多,有些因素是可以控制的,有些则难以控制,为了减少多因素及难以控制因素的影响,实验中应同时设立对照组,用对照组和实验组间的比较来消除各种无关因素的影响,使实验结果误差尽可能地缩小,达到正确评价药物效果的目的。

        材料与仪器

        步骤

        一、实验装置及其连接:

        拮抗法

         
        二、标本制作:
         
        取体重2 kg左右家兔,雌雄不拘,击昏后开胸剪取胸主动脉,立即置入通有95%O2和5%CO2混合气体的Kerb’s溶液中。仔细除去血管周围结缔组织,套在细棒上,剪成25×3 cm的螺旋条,两端分别结扎并留置一段线头。将标本放入盛有10 ml Kreb’s溶液的浴槽中(pH7.3~7.4,37 ℃通入混合气体1~2 个气泡/秒)。一端固定于标本板小钩上,另一端与张力传感器相连。负荷4 g,平衡1 h,其间每15分钟换一次营养液。
         
        给药:按以下顺序向浴槽内加入去甲肾上腺素(NA)。
         

        拮抗法

         
        注:前次给药后如无反应或出现收缩达最大效应时给下一剂量。当给下一剂量后收缩反应不再增加时,冲洗标本,直至回复到基线后加入α-受体阻断剂酚妥拉明(phentolamine,Regintin),给药量为10-5 mol/L 0.03 ml,即浴槽浓度3×10-8 mol/l,15 min后重复上述给药步骤。
         
        绘制量效曲线:
         
        以对照曲线的最大反应为100%,分别求出给phentolamine 前后NA 各剂量的反应百分率。以phentolamine克分子浓度的负对数为横座标,反应百分率为纵座标在坐标纸上绘出量效曲线。
         
        pA2值计算:
         
        据公式: pA2=PAx+log(Ab/A—1)
         
        式中: Pax:竞争性拮抗剂克分子浓度负对数。
         
        Ab:竞争性拮抗剂存在时,激动剂引起50%反应的剂量(ED50’)
         
        A:无拮抗剂时,激动剂引起50%反应所需剂量(ED50)
         
        将各所得数据代入公式即得pA2值。

        注意事项

        1.  勿用力牵拉血管标本;
         
        2.  爱惜传感器,操作动作要轻;
         
        3.  加药应及时,准确。

        来源:丁香实验

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