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        支原体半固体培养基接种法

        相关实验:支原体培养实验

        最新修订时间:

        原理

        一、标本采集
         
        支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。
         
        二、分离培养
         
        混种法:在制备半固体培养基时,培养基加热溶化,温度降至50℃时,添加动物血清、酵母浸液及青霉素后混匀,待冷却至37~40℃时,用无菌滴管吸取标本0.5~1 ml加入培养基中,充分混匀,凝固后置37℃孵育。
         
        三、结果观察
         
        绝大多数支原体为兼性厌氧,少数在含10% CO2和相对湿度80~90%的大气环境中生长良好。支原体生长缓慢,多数于3~4 d长出菌落,少数于1~2 w方长出典型菌落,在平皿固体培养基上生长的菌落呈"油煎蛋"状,边缘不整齐。

        材料与仪器

        步骤

        常见问题

        一、附录
         
        糖酵解培养基(肺炎支原体培养基)
        基础培养基 70 ml
        马(或牛血清) 20 ml
        25%酵母浸液 10 ml
        0.4%酚红 0.5 ml
        1%醋酸铊 2.5 ml
        青霉素10000 IU/ml 5.0 ml
        调pH 7.8

        来源:丁香实验

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