不染色标本的观察

最新修订时间：2024-05-13

原理

应用不染色标本可直接观察活细菌的形态和运动，且能避免由于某些染色操作而引起细菌变形，常用的不染色标本的制备方法有悬滴法和压滴法。

材料与仪器

实验材料	葡萄球菌6~12h肉汤培养物枯草杆菌6~12h肉汤培养物
试剂、试剂盒	凡士林
仪器、耗材	载玻片接种环凹玻片煤气灯盖玻片

步骤

一、悬滴法

取清洁的凹玻片和盖玻片各一张，涂少许凡士林于凹玻片窝的周围；取一接种环枯草杆菌肉汤培养物滴于盖玻片之中央，将盖玻片迅速翻转，复盖于凹玻片窝上(图1-1)。轻压盖片，使其固定并密封，防止菌液变干，便于长时间观察。同法再以葡萄球菌肉汤培养物做一悬滴片。

镜检方法：将集光器稍降下，使视野内光线变暗。用低倍镜找出悬滴的边缘，然后换用高倍镜或油镜观察滴内细菌的形态和运动。枯草杆菌有鞭毛能运动。它们可向不同方向运动，速度较快，相互间的位移很大。葡萄球菌没有鞭毛不能做固有运动，但由于受水分子的撞击而呈分子运动(布朗氏运动)，只在一定范围内作往复颤动，相互间位移不大。按细菌运动性的不同，可以推知细菌有无鞭毛，这是鉴别菌种的要点之一。

二、压滴法

分别取枯草杆菌和葡萄球菌肉汤培养物，放于载物片中央。小心地把盖玻片放于液滴之上，勿使中间产生气泡，中间液层越薄越好。镜检方法与悬滴法相同。本法较悬滴法简单，但标本容易干涸，不能长时间观察(注意：勿将菌液压溢到玻片边缘之外)。

常见问题

一、附录

接种环和接种针：接种环又称为白金耳，接种针又称为白金线，是细菌取材或接种的常用工具。前端通常用细电炉丝制成，损坏时可自行更换；也可用白金丝制作，但价格昂贵。

来源：丁香实验