纳氏试剂比色法

一、仪器
 

1.  50 mL比色管10支，支管架1支。
 

2.  1 mL、2 mL、10 mL移液管。
 

（3）250 mL锥形瓶。
 

（4）漏斗、滤纸。
 

（5）300 mL烧杯。
 

（6）可见分光光度计。
 

二、药品
 

酒石酸钾钠、碘化钾、碘化汞、氢氧化钠、氯化铵、硫酸锌。
 

三、试剂
 

1.  纳氏试剂

称取16 g氢氧化钠，溶于50 mL水中，充分冷却至室温；另称取7 g碘化钾和10 g碘化汞（HgI₂）溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中用水稀释至100 mL， 贮于聚乙稀瓶中，密塞保存。
 

2.  酒石酸钾钠溶液

称取50 g酒石酸钾钠溶于100 mL水中，加热煮沸以去除氨，冷却后定容至100 mL。
 

3.  铵标准贮备液（CNH4+ －N=100mg/mL）：称取3.819g经100℃干燥过的优级纯氯化铵（NH4Cl）溶于水中，移入1000mL容量瓶，定容。此溶液为每毫升含1.00mg铵氮。
 

4.  铵标准使用液（CNH4+ －N =1.00ug/mL）：取上述溶液稀释100倍即可。
 

四、实验步骤
 

1.  水样的保存

水样采集在聚乙烯瓶中或玻璃瓶中，并应尽快分析，必要时可加硫酸将水样酸化至pH＜2，于2～5°C下存放。酸化样品应注意防止吸收空气中的氨而沾污。
 

2.  水样的预处理

水样带色或者浑浊以及含其他一些干扰物质都会影响氨氮的测定。为此，在分析时需作适当的预处理。对较清洁的水，可采用絮凝沉淀法；对污染严重的水或工业废水，则用蒸馏法消除干扰。
 

（1）絮凝沉淀法：取100 mL水样于具塞量筒或比色管中，加入1 mL 10%硫酸锌溶液和0.1～0.2 mL25%氢氧化钠溶液，调节pH至10.5左右，混匀。放置使沉淀，用中速经无氨水充分洗涤过的滤纸过滤，弃去初滤液20 mL。
 

（2）蒸馏法：加250 mL水样于凯氏烧瓶中，加0.25轻质氧化镁和数粒玻璃珠，加热蒸馏至馏出液不含氨为止，弃去瓶内残渣。
 

3、  标准曲线的绘制

分别吸取0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00mL铵标准使用液（试剂4）于50 mL比色管中，加水至标线，加1 mL酒石酸钾钠溶液（试剂2），混匀；加1.5 mL纳氏试剂（试剂1），混匀，即得浓度分别为0.00、0.005、0.01、0.03、0.05、0.07、0.10 mg/L的标准系列溶液。放置10 min后，在波长420 nm处，用光程2 cm比色皿，以无氨水为参比，测吸光度，绘制标准曲线。

4.  水样的测定

取适量经絮凝预处理后的水样（使氨氮含量含量不超过0.1 mg），加入50 mL比色管中，稀释至标线，加1 mL酒石酸钾钠溶液（试剂2），混匀；加1.5mL纳氏试剂（试剂1），混匀。放置10 min后，在波长420 nm处，用光程2 cm比色皿，以无氨

水为参比，测吸光度。
 

五、结果计算
 

氨氮（N，mg/L）= m×1000/V

式中：

m——由标准曲线查得的氨氮量，mg；

V——水样体积，mL。

 

1.  钠氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例，对显色反应的灵敏度有较大影响，静置后生成的沉淀应除去。
 

2.  滤纸中常含痕量铵盐，使用时注意用无氨水洗涤。所用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的沾污。
 

3.  实验全过程均使用无氨水。