• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        机械搅拌发酵罐发酵法

        相关实验:枯草芽孢杆菌发酵培养实验

        最新修订时间:

        原理

        从试管菌种开始,通过逐级扩大增加培养物,最终使用机械搅拌罐发酵枯草芽孢杆菌。摇瓶培养是实验室常用的通风培养方法,通过装有液体培养物的三角瓶放在摇床上振荡培养,以满足微生物的生长、繁殖及产生许多代谢产物对氧的需求,它是实验室摸索工艺条件的常用方法。

        材料与仪器

        步骤

        一、实验材料
         
        枯草芽孢杆菌, 种子培养基,发酵培养基,恒温摇床,无菌吸管,试管,三角瓶,发酵罐。
         
        二、实验方法
         
        1.  工艺流程
        试管斜面菌种(12 h,37℃)→接种(1环菌苔)→摇瓶种子培养液中,250 mL三角瓶振荡培养(12 h,37℃)→种子培养液,接种(1%-5%)→机械搅拌发酵罐发酵。
         
        2.  发酵罐种子液的制备
        摇瓶种子培养基:葡萄糖 20 g,牛肉膏1 g,蛋白胨5 g, NaCl 5 g,H2 O 1 000 ml,pH自然 ,高压灭菌锅121℃灭菌20 min。
        摇瓶种子培养基分装于250ml三角瓶,每瓶50ml。从斜面上挑取一环菌种,接入摇瓶种子培养基,37℃,150rpm振荡培养12小时即为种子液。
         
        3.  发酵培养基制备
         
        发酵培养基:蔗糖20 g,淀粉20 g,酵母膏1 g,蛋白胨5 g, NaNO3 3 g,KH2PO4 5 g, CaCO3 10 g,H2O 1 000 ml;pH7.0。
         
        淀粉糊化:淀粉:水=1:4加入预热至60℃水中,边加边搅拌,煮沸10分钟成糊状(煮沸过程中不断搅拌)。
         
        4.  发酵(演示)
         
        ①空消:空罐灭菌。
         
        ②实消:将发酵培养基5L从进样口倒入15 L发酵罐中,盖上盖子。检查发酵罐安装完好后, 105℃灭菌15分钟。
         
        ③接种:可以采用火焰接种法,在接种口放置酒精圈,点燃后,将菌种通过火焰圈迅速倒入发酵罐内,进行计时培养。
         
        ④发酵:种子培养好后,将种子接到发酵罐中,接种量1-5%,36°C—37°C 控温通风培养,搅拌转速200转/分,0~1 h,通风比l:0.5~0.8;35 hr以后调速380转/分;24~28小时,通风1:1.0。每6小时测定活力一次,外观糖一次;每2小时测pH一次,记录通风量,转速、温度等。发酵过程监测时,注意观察发酵罐的结构,测定结果记录于表,测定时同时镜检。定期测定菌浓,当菌浓达到最高时结束发酵。
         
        ⑤取样:自培养操作开始起,每6h取1次样。取样前后,要用蒸汽冲取样口。
         
         

        注意事项

        一、试管接摇瓶前,摇瓶培养基要设肉汤平板划线空白对照,检查摇瓶种子培养基是否灭菌彻底。
         
        二、种子培养液接发酵罐之前,要对种子培养液镜检,检查是否有杂菌污染。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序