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        碱处理法

        相关实验:重组蛋白质的大规模生产实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1.  用SDS-聚丙烯酰胺凝胶制备电泳分离放射性标记的瞵酸化蛋白质,电转移至PVDF膜上。
         
        2.  用水充分洗膜,用1 000 ml 水洗3次,每次2 min。
         
        3.  塑料容器内,用足够的1 mol/l KOH浸过膜,在55℃烤箱或水浴锅內温育120 min。

        4.  倒尽KOH,膜用500 ml TN缓冲液浸泡5 min 以中和残余的KOH,用500 ml 1 mol/l Tris·Cl(pH7.0)浸泡5 min,再用500 ml 水浸洗2次,每次5 min,用塑料包装膜包好PVDF膜,使用经预闪光致敏的X光片和增感屏,在-70℃进行自显影过夜。

        来源:丁香实验

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