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        白细胞移动抑制实验

        相关实验:白细胞移动抑制实验

        最新修订时间:

        原理

        检查白细胞移动抑制因子的存在,是借其抑制白细胞移动的生物活性为指标的,依观察白细胞移动的方式不同,移动抑制试验有三种不同的方法,即毛细管法,琼脂糖打孔法及琼脂糖微滴法,这里介绍毛细管法。

        材料与仪器

        步骤

        1.   淋巴细胞提取。

        2.   用无菌镊子夹毛细管,插入细胞悬液中,使细胞悬液借毛细管现象进入毛细管内,在离上端7~8mm时,将毛细管取出,装入各毛细管中,使细胞悬液高度力求相对等。

        3.   将毛细管空端经火焰封固端朝下置试管中,于水平离心机内1000转/5,10分钟。

        4.  取出毛细管可见细胞被压紧里4~6 mm 高的柱,表层发白主要是白细胞,下层发红为红、白细胞混合存在。用小砂轮在毛细管壁的细胞——液体界面处划痕,小心折断。

        5.  将溢满细胞的毛细管蘸少许凡士林,置平底凹玻中固定,每凹放2~8只毛细管,而后滴加培养液,将毛细管分为两组,每组3~4支,一组为实验组,另一组为对照组。

        6.  试验组用199培养加适量抗原作培养液,对照组只用199液作培养液,不加抗原。

        7.   凹孔上加盖玻片封闭,勿留有气泡,将凹玻片置于铺有湿布纱布的铝盒中,置37℃温箱中培养18~22hr。

        8.   取出凹玻片,用解剖显微镜测定各毛细管白细胞移动的扇面之长短直径。试验结果用移动指数MI表示:
         
        白细胞移动抑制实验
         
        9.  正常值80~120%。80%以下皆为抑制,即移动抑制阳性。120%以下皆为刺激,刺激反应的产生可能是抗原浓度偏低。

        来源:丁香实验

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