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        备选方案

        相关实验:IgG 抗体纯化实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1.  准备好一根DEAE-Affi-Gel Blue柱子。用5倍柱床体积的加样缓冲液平衡(7 ml 柱床体积/ml 抗血清或腹水)。此步骤及以下各步均在4℃下操作实施。

        2.  于4℃下透析样品40 h,中间换2次加样缓冲液(每次换大约4 L)加样上柱,速度为10 ml/h。用3倍柱床体积的加样缓冲液以10 ml/h 的速度洗脱未结合的蛋白质。
         
        3.  用洗脱缓冲液以10 ml/h 的速度洗脱结合的IgG组分,以10 ml 为一组分分部收集洗脱液,并贮存于4℃,直至合并各组分。
         
        4.  每组分取30~50 μl,用10%SDS-PAGE在还原条件下检测组分中是否含有IgG,合并含有IgG的组分,在4℃下透析大于40 h,期间换2次缓冲液。
         
        5.  用5倍柱床体积的加样缓冲液重新平衡DEAE-Affi-Gel Blue柱,加少许NaN3晶体, 贮存于4℃。

        来源:丁香实验

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