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        生长曲线测定

        相关实验:大肠杆菌生长曲线测定实验

        最新修订时间:

        原理

        测定微生物生长曲线的方法很多,有血球计数法、平板菌落计数法、称重法、比浊法等。本实验采用比浊法测定,由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比,因此,可利用光电比色计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度,并将所测得的光密度值(OD值)与其对应的培养时间作图,即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。现已有直接用试管就可以测定OD值的光电比色计,只要接种一支试管,定期用它测定,便可做出该菌的生长曲线。

        材料与仪器

        步骤

        1.  编号
        取11支盛有肉膏蛋白胨液体培养基的大试管,用记号笔标明培养时间,即0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、20小时。

        2.  接种
        用1 ml 无菌吸管,每次准确地吸取0.2 ml 大肠杆菌培养液,分别接种到已编号的11支肉膏蛋白胨液体培养基大试管中,接种后振荡,使菌体混匀。

        3.  培养
        将接种后的11支试管置于自控水浴振荡器或摇床上,37℃振荡培养。分别在0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、20小时将编号为对应时间的试管取出,立即放冰箱中贮存,最后一同比浊测定光密度值。

        4.  比浊测定
        以未接种的肉膏蛋白胨培养基作空白对照,选用540~560 nm 波长进行光电比浊测定。从最稀浓度的菌悬液开始依次进行测定,对浓度大的菌悬液用未接种的肉膏蛋白胨液体培养基适当稀释后测定,使其光密度值在0.1~0.65以内,记录OD值时,注意乘上所稀释的倍数。
         
        5.  结果
        将测定的OD值填入下表。
        生长曲线测定

        来源:丁香实验

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