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        镉-血红素法

        相关实验:金属硫蛋白的测定实验

        最新修订时间:

        原理

        MT是一种低分子量的蛋白质,含有大量的半胱氨酸,并对金属有较高的亲和性。

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        一、实验步骤

        1.  组织按1:4(w/v)加入0.25 mol/l 蔗糖溶液,制备匀浆,18 000 g离心20 min(4℃)。

        2.  取上清液0.5 ml,加入1.9 ml 0.03 mol/l Tris-HCl缓冲液(pH8.0)。

        3.  再加入1 ml CdCl2(10ppm)混匀,室温孵育5 min。

        4.  加入2%牛血红蛋白0.2 ml,沸水浴1 min,室温离心1 000 g,5 min。

        5.  反复加入牛血红蛋白,加热、离心3次。

        6.  在原子吸收分光光度计,用石墨法测定上清液Cd含量。

        7.  组织MT含量按6 g原子Cd结合可分子MT计算。

        8.  按Bradford 法测定上清液中的蛋白质含量。

        来源:丁香实验

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