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        藻酸盐包裹实验

        相关实验:藻酸盐包裹实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1. 将藻酸钠溶于无菌生理盐水,终浓度为1.5%;
         
        2. 收集培养的肿瘤细胞,用无血清的培养基洗涤1 次,将细胞沉淀重悬于1.5%藻酸钠溶液中;
         
        3. 将上述肿瘤细胞悬浮液用1 ml 加样枪缓慢滴入磁力搅拌的250 mM CaCl2 溶液中,形成乳白色的藻酸盐小珠。继续静置于250 mM CaCl2 中30 min 即可使用。以上操作步骤均在无菌条件下进行;
         
        4. 将第4 次免疫后7 天的小鼠用苯巴比妥钠0.1ml (按100 mg/kg 计) 腹腔注射麻醉,小鼠麻醉后置于解剖台上,切开背部皮肤,皮下植入4 粒藻酸盐包裹颗粒,缝合皮肤,外敷手术胶膜;
         
        5. 天以后,小鼠经尾静脉注入100 μl (按100 mg/kg 计) FITC 标记的葡聚糖(FITCDextran);
         
        6. 20 min 后处死动物,取出藻酸盐颗粒,常温下加入1 ml 的生理盐水,剪碎研磨颗粒,再加入1 ml 的生理盐水,混匀标本,放置1 小时,1500 rpm 离心5 min。取上清液用荧光酶标仪测定;
         
        7. 用不同浓度的FITC-Dextra n 制备标准曲线。

        来源:丁香实验

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