• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        斑点金免疫渗滤测定法(DIGFA)

        相关实验:斑点金免疫渗滤测定(DIGFA)实验

        最新修订时间:

        原理

        斑点金免疫渗滤测定实验是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。

        材料与仪器

        步骤

        一、试剂及材料
         
        1.  渗滤装置:为一塑料小盒(4x3x0.6 cm),分为底、盖两层,盖的中央有一个直径0.5 cm的小孔。盒底充填吸水性较强的垫料,盖孔下,紧贴垫料放置一片NC膜。紧闭盒盖,即为渗滤装置。在孔中的NC膜上点加1-2 ml特异性抗体(一抗)或抗原,室温自然干燥,保存于放干燥剂的密封塑料袋中备用。
         
        2.  封闭液:含0.2%BSA和0.05%吐温-20的洗涤液。
         
        3.  洗涤液:50 mol/L,pH7.2 PBS。
         
        4.  特异性抗体(一抗)或抗原
         
        5.  金标抗体
         
        二、操作方法
         
        1. 取出渗滤器,先在小孔的NC膜上,滴加2滴(约100 ml)封闭液;
         
        2. 待其渗入盒内,在NC膜上,加待检标本1滴(约50 ml);
         
        3. 待其渗入盒内,在NC膜上,滴加2滴(约100 ml)洗涤液;
         
        4. 待其渗入盒内,在NC膜上,加金标抗体1滴(约50 ml),使其与NC膜上吸附的检品发生反应;
         
        5. 待其渗入盒内,在NC膜上,滴加2滴(约100 ml)洗涤液;
         
        6. 至洗涤液完全渗入盒内
         
        三、结果观察
         
        在小孔NC膜上出现红色反应时为阳性反应,阴性反应不着色。
         
         

        注意事项

        1.   特异性抗体(一抗)或抗原、待检标本和金标抗体的用量事先都必须应用方阵法确定最适用量。
         
        2.   盒底充填的垫料吸水性要强,否则影响结果。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序