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        生物药糖基化位点检测

        相关实验:生物药糖基化位点检测

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        (1) 使用trypsin或其他适当的蛋白酶对样品进行酶切; (2) 选取合适的色谱柱对N-glycopeptides, O-glycopeptides及其他多肽进行分离; (3) 脱糖基化处理; (4) 通过MALDI-TOF MS, ESI-MS或MS/MS 对多肽图谱进行分析,找出糖基化的理论位置; (5) 通过多肽图谱确定每一个N-/O-糖原的位点; (6) 对不同批次样品的糖基化位点进行比对。

        注意事项

        在收取样品后首先对样品进行酶切,释放抗体的Fc domain和Fab,然后对糖基化片段进行分离,通过MALDI TOF MS或nano LC-ESI-MS/MS对糖基化位点进行确证。

        来源:丁香实验

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