植物细胞器的荧光标记及观察
植物学实验
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简介
植物细胞内含有丰富的细胞器，包括液泡、质体、线粒体、高尔基体、核糖体、内质网、微管和微丝、细胞核等，其中，液泡和质体是植物细胞特有的细胞器。随着细胞生物学研究的深入，植物细胞内大多数的细胞器都可以被特异性的荧光染料所标记，从而极大地方便了人们对细胞内的生命活动的探索。
目前，植物细胞中很多细胞器都可以被染料特异性标记，有些染料可以透过细胞膜，被用来标记活细胞内的特定细胞器，有些染料则不能透过细胞膜，只能标记死细胞内的特定细胞器，下表中列举了一些常用的细胞器染料（表26-1）。
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细胞器 |
染料 |
活细胞/死细胞 |
染色原理 |
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细胞核 |
DAPI（4'，6-diamidino-2-phenylindole） |
活细胞/死细胞 |
DAPI为一种荧光染料，可以穿透细胞膜与细胞核中的双链 DNA 结合而发挥标记的作用，产生比 DAPI 自身强 20 多倍的荧光，显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞 |
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液泡 |
中性红 |
活细胞 |
中性红是一种弱碱性 pH 指示剂，变色范围为 pH 6.4~8.0（由红变黄）。在中性或微碱性环境中，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中运输，由于液泡在一般情况下呈酸性反应，因此，进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色。在这种情况下，原生质和细胞壁一般不着色；在死细胞中由于原生质变性凝固，细胞液不能维持在液泡内，因此，用中性红染色后，不产生液泡着色现象，相反，中性红的阳离子，却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合，而使原生质与细胞核染色 |
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线粒体 |
詹纳斯绿B（Janus green B） |
活细胞 |
Janus green B 的染色是由于线粒体中的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保持氧化状态呈蓝绿色；而在周围的细胞质中染料被还原成无色的色基 |
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微丝 |
鬼笔环肽（phalloidin） |
活细胞/死细胞 |
鬼笔环肽与微丝能够特异性结合，使微丝纤维稳定而抑制其功能。荧光标记的鬼笔环肽可特异性显示细胞内的微丝 |
来源：丁香实验团队
操作方法
植物细胞内含有丰富的细胞器，包括液泡、质体、线粒体、高尔基体、核糖体、内质网、微管和微丝、细胞核等，其中，液泡和质体是植物细胞特有的细胞器。随着细胞生物学研究的深入，植物细胞内大多数的细胞器都可以被特异性的荧光染料所标记，从而极大地方便了人们对细胞内的生命活动的探索。目前，植物细胞中很多细胞器都可以被染料特异性标记，有些染料可以透过细胞膜，被用来标记活细胞内的特定细胞器，有些染料则不能透过细胞膜，
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