叶绿体色素的提取、分离和理化性质观察

叶绿体色素的提取、分离和理化性质观察的基本原理是叶绿体色素主要由叶绿素 a、叶绿素 b、胡萝卜素和叶黄素组成。它们与类囊体膜相结合成为色素蛋白复合体。这两类色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇、丙酮等有机溶剂提取。提取液可用色谱分析的原理加以分离。因吸附剂对不同物质的吸附力不同，当用适当的溶剂推动时，混合物中各种成分在两相（固定相和流动相）间具有不同的分配系数，所以移动速度不同，经过一定时间后，可将各种色素分开。叶绿素与类胡萝卜素都具有特异的吸收光谱，可用分光光度计精确测定。

叶绿素荧光现象：当叶绿素分子吸收光量子而转变成激发态时，分子很不稳定，当它变回到基态时发射出红光量子，称为荧光现象。所以，透射光下观察浓叶绿体色素提取液呈绿色，反射光观察浓叶绿体色素提取液呈红色。

叶绿素是一种二梭酸——叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的复杂酯，因而可与碱发生皂化作用，产生的盐可溶于水中，利用此法可将叶绿素与类胡萝卜素分开。

叶绿素分子中的镁可被 H⁺ 所取代而形成褐色的去镁叶绿素。后者遇铜形成的绿色的铜代叶绿素很稳定，在光下不易被破坏，故常用此法制作标本；叶绿素分子的化学性质也很不稳定，易受强光破坏，特别是当叶绿素与蛋白质分离后，破坏更快。