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        冰冻切片免疫荧光

        最新修订时间:

        简介

        观察组织中目的蛋白的定位

        原理

        免疫荧光技术亦称荧光抗体技术,应用化学方法将荧光色素(主要是异硫氰酸荧光黄FITC)与抗体结合起来,即荧光抗体,这种结合荧光色素的抗体的免疫原性并不因此而发生改变。在特定条件下用荧光抗体染标本,如果标本中存在有相应的抗原,荧光抗体便与标本中的抗原发生特异性结合,在荧光显微镜的蓝紫光或紫外光照射下,标本中的抗原抗体复合物便发出特异的荧光,荧光的出现表明被检标本中特异抗原的存在。

        应用

        免疫染色

        来源:丁香实验

        操作方法

        冰冻切片免疫荧光

        1. 冰冻切片一般选择多聚赖氨酸黏附性载玻片,多聚赖氨酸处理载玻片是带强阳离子的,主要用于病理组织切片、液基细胞学涂片,作用是防止玻片掉片。冰冻切片之后如果不即时染色,可将片子放于负八十冰箱。再次取出后可先在室温晾干 15 分钟。然后置 PBS 中浸泡 10 分钟,以去除 OCT;2. 用组化油笔将待染组织圈好,目的是为了在进行后续孵育抗体时尽量缩小范围,使抗体进行有效的孵育;3. 0.5%Tri

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