细胞成分分离实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

细胞成分分离实验是出于不同的研究目的，人们会需要分离细胞的不同次级组分，包括细胞核、质膜、线粒体、溶酶体和微粒体等，只有这样人们才能对分离得到的组分分别进行进一步的分析，其中包括结构、组分以及代谢等。目前，用于细胞成分分离的方法主要有 2 种：差速离心法分离细胞和细胞器、密度梯度离心法分离细胞组分和 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离蛋白质。

原理

差速离心法分离细胞和细胞器的基本原理是各种不同的细胞和细胞内的各种细胞器的大小、密度不同，在同一离心场内的沉降速度也不同。根据这一原理，可用差速离心法、密度梯度离心法或密度梯度平衡离心法来分离细胞及细胞器。其中差速离心法是以从低到高不同的转速离心，使较大的颗粒先在低转速中沉淀，再用较高的转速将原来悬浮在上清液中的小颗粒物质沉淀下来，从而达到逐级分离胞（细胞器）的目的。

密度梯度离心法分离细胞组分的基本原理是细胞内的各种成分密度不一样，在同一离心场内的沉降速度也不同，为了得到较纯的细胞组分，将差速离心分离得到的沉淀物进行密度梯度离心，即将梯度介质从离心管底到管口制成几级不同的浓度的区带，当形状、大小和密度不同的细胞成分加入管面，经超速离心后，就会集中于不同的区带，可从不同的区带中分别收集到纯度很高的细胞器或细胞组分。

来源：丁香实验团队

操作方法

差速离心法分离细胞和细胞器

差速离心法是以从低到高不同的转速离心，使较大的颗粒先在低转速中沉淀，再用较高的转速将原来悬浮在上清液中的小颗粒物质沉淀下来，从而达到逐级分离胞（细胞器）的目的。

密度梯度离心法分离细胞组分

密度梯度离心法分离细胞组分是将差速离心分离得到的沉淀物进行密度梯度离心，即将梯度介质从离心管底到管口制成几级不同的浓度的区带，当形状、大小和密度不同的细胞成分加入管面，经超速离心后，就会集中于不同的区带，可从不同的区带中分别收集到纯度很高的细胞器或细胞组分。