正常细胞常规核型的标本制备实验

1. 打开超净台紫外灯20~30分钟。 2. 洗手、换洁净白大衣后进入操作室。启动超净台，点燃煤气灯。 3. 用75%酒精棉球擦洗手、各种试剂瓶及操作台面，然后将培养液及肝素、秋水仙素、PHA等所需溶液移入超净台。 4. 在超净台内将每个培养瓶装入5 ml 培养液及0.2 ml PHA溶液，封好备用。 5. 用5 ml 注射器，7号针头，先吸取少许肝素湿润针筒，然后

1. 微量全血细胞培养至68小时左右，用1 ml 注射器号针头向每个5 ml 培养瓶内加2滴秋水仙素溶液。 2. 摇匀后继续培养3小时，此项操作不需要严格无菌。 3. 按时终止培养，用吸管温和吹打成细胞悬液后，移至10 ml 离心管中。 4. 用天平平衡后以1000 rpm 离心8分钟，弃大部上清，剩0.5 ml。 5. 再吹打成细胞悬液，加入预热37℃的 0.075

1. 以1.6x 105个/ml 细胞浓度将FL-60细胞接种于培养瓶内。 2. 48小时后以终浓度为0.04ug/ml 的秋水仙素处理2.5小时，移入10 ml 离心管。 3. 其余步骤与淋巴细胞染色体制备相同。 4. 将长成单层的HeLa细胞按1：2传代进行培养，36小时后用终浓度为0.04 ug/ml 的秋水仙素处理3小时。 5. 按时终止培养，用0.25%胰蛋白酶-0.02%ED

一、人体染色体的观察 1. 取制备较好的染色体玻片标本，先在低倍镜下观察。 2. 在标本中选择一个染色体之间分散较好，互不重叠的中期分裂相，置于视野中央，然后换油镜仔细观察。 3. 每个染色体都含有两条染色单体，两单体连接处为着丝粒。 4. 计数时要把分散的染色体划分为几个区域以免计数重复或遗漏，然后计数并判定性别。 二、核型分析的方法 1. 人体染色