细胞实验

乳汁和乳房复位成形术切除组织是正常乳腺导管上皮的合适材料来源，从乳汁能得到较纯的上皮细胞。最好用胶原蛋白酶进行初步消化分离，在胎儿小肠饲养层上培养细胞可抑制正常组织和癌组织的基质细胞污染,用最适宜的培养液能对上皮细胞进行连续传代和克隆培养。胶原蛋白凝胶培养法有利于构建类似于供体组织的三维结构。来源：动物细胞培养：基础技术指南第五版

本实验来源于：动物细胞培养——基本技术指南（第五版）

将细胞悬浮在含美希索的培养基中，将这种细胞种于铺有琼脂（或琼脂糖）凝胶底层的培养皿中。

尽管人结肠癌的连续细胞系已有许多报道，但正常肠上皮培养的报道较少。Owens 等能够从胎儿肠上皮分离细胞，建立有限细胞系（FHS74Int)。鼠肠上皮细胞系IEC-6得到了广泛应用。本方案是由 Booth 和 O’Shea 的方法简化而来的。关于详细描述、不同方法和应用应査阅他们的方法。

温度高时琼脂呈液态，但在37℃ 时成凝胶状态，细胞悬浮在温暖的琼脂凝胶培养基中，待琼脂形成凝胶后进行培养，形成散在集落，很容易分离。

由于根据需要的器官培养技术需将组织放在理想的气体和营养物质交换的位置，故这残技术大多数是将组织放在半间体琼脂凝胶底物上 或凝 集 血 浆的气液界面卜.，或放在由不锈钢网支托的微孔滤膜、 擦 镜 纸 或 人 造 纤 维 的 筏 上，或 黏 附 到 有 机 玻 璃 或 树 脂 玻 璃 条上的气液界面。 目前用滤膜培养皿最容易获得这种几何形状。来源：动物细胞培养：基础技术指南第五版

将 4~8 只新生鼠的小脑切成小立方块，放入 HBSS，在 37°C 条件下用胰蛋白酶消化 15 min。将细胞接种于涂有 L-多聚赖氨酸的培养皿或培养瓶。

接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前，中等密度，用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。

收集对数生长晚期的同源或异源细胞系的培养基，过滤，根据需要用新鲜培养基稀释。

饲养层技术取决于通过其他接触抑制细胞形成的单层预防成纤维细胞的过度生长。 饲养层技术并不能选择性抑制正常上皮细胞， W为正常表皮细胞和正常乳腺上皮都能在 汇合的伺养层上形成克隆。然而，神经胶质瘤研究的结果表明，在同种饲养层上选择培养等同的正常细胞是可能的。

低密度接种细胞，培养至集落形成，细胞染色（用于克隆形成率和存活检测 ) 或用于筛选时分离细胞、然后扩增为细胞株。

将胶原蛋 A 酶液注入血管腔后孵育，从而分离内皮细胞。在涂有明胶的底物上用合适培养液培养时，内皮细胞呈几倍增殖。免疫磁珠分离法用于从已分散的心脏组织分离内皮组织。

从悬浮细胞培养物中吸取样品，细胞计数，接种适量的悬浮细胞至新培养瓶的新鲜培养基中，使细胞浓度与开始培养时一致。

本方案实在在涂有胶原蛋白的培养皿内培养分离获得的胰腺泡上皮细胞。进而建立二维的聚集克隆，以便用于研究。来源：动物细胞培养：基础技术指南第五版

去除培养基，加人胰蛋白酶短暂作用，孵育，以培养基分散细胞，计数，稀释并再接种。

尽管自成人肝分离的细胞不表达肝实质的全部特性，但能够培养合适的细胞系是无疑的。迄今为止，建立持续增殖的细胞系的愿望尚未完全实现。但是，能够在适当条件下培养功能性肝细胞。来源：动物细胞培养：基础技术指南第五版

在 25 ml 缧口盖离心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液，将 9 ml 含 2×107 个细胞的培养基加在上面，离心，从交界部位收集活细胞。

人们一直试图用培养的角膜上皮取代兔眼实验（Draze 实验），故对于培养形成角膜产生了很大兴趣。下列有关在无血清培养液中培养正常人角膜上皮细胞的介绍和方案 23.2 。来源：动物细胞培养：基础技术指南第五版

用力使培养基中的组织通过一系列筛孔尺寸逐渐减小的筛网，直到产生单细胞或小组织块的理想悬液，悬液可直接稀释并培养。

藻酸盐微珠培养基于在软骨细胞藻酸盐悬液中氯化钙的胶凝作用。