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        细菌芽孢染色实验

        实验分类:

        微生物实验

        最新修订时间:

        简介

        芽孢又叫内生孢子(endospore),是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体,通常呈圆形或椭圆形。细菌能否形成芽孢以及芽孢的形状、芽孢在芽孢囊内的位置。芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一。

        由于芽孢壁厚、透性低、不易着色。当用石炭酸复红。结晶紫等进行单染色时,菌体和芽孢囊着色。而芽孢囊内的芽孢不着色或仅显很淡的颜色,游离的芽孢呈淡红或淡蓝紫色的圆或椭圆形的圈。为了使芽孢着色便于观察,可用芽孢染色法。


        来源:《微生物学实验(第三版)》


        来源:丁香实验

        操作方法

        改良的Schaeffer-Fulton 氏染色法

        1. 制备菌悬液加 1~2 滴水于小试管中,用接种环挑取 2~3 环菌苔于试管中。搅拌均匀,制成浓的菌悬液。2. 染色加孔雀绿染液 2~3 滴于小试管中,井使其与菌液混合均匀,然后将试管置于沸水浴的烧杯中,加热染色 15~20 min。3. 涂片固定用接种环挑取试管底部菌液数环于洁净载玻片上,涂成薄膜,然后将涂片通过火焰 3 次温热固定。4. 脱色水洗,直至流出的水无绿色为止。5. 复染用番红染液

        Schaeffer- Fulton 氏染色法

        1. 制片按常规涂片、干燥、固定。2. 染色加数滴孔雀绿染液于涂片上,用木夹夹住载玻片一端,在微火上加热至染料冒蒸气并开始计时,维持 5 min。3. 水洗待玻片冷却后,用缓流自来水冲洗,直至流出的水无色为止。4. 复染用番红染液复染 2 min。5. 水洗用缓流水洗后,吸干。6. 镜检干后油镜观察。芽孢呈绿色,芽孢囊及营养体为红色。

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