收藏
线形质粒DNA 5'-粘性末端去磷酸实验
最新修订时间：
简介
经限制性内切酶酶切的质粒DNA 5'端均带有磷酸集团，如用此载体直接转化大肠杆菌，其自身环化几率非常高，影响连接、转化效率。因此一般酶切的质粒DNA要经脱磷，使用碱性磷酸酶(CIAP)去除5'端磷酸集团。
来源：丁香实验
操作方法
1、质粒DNA和CIAP以及BUFFER 37 ℃水浴30min 2、补充CIAP 再37 ℃水浴30min 3、加入50 mM EDTA至终浓度5 mM 75 ℃加热10min 失活CIAP 4、冷却至室温，酚-氯仿抽提，乙醇沉淀浓缩。 5、抽干溶液，加适量TE溶解。
相关产品推荐
H3N2(A/Aichi/2/1968) HA expression plasmid | 甲型流感H3N2(A/Aichi/2/1968) HA 蛋白表达质粒DNA
￥1890
实验室标签，描述: 实验室试剂标签1;包装: 1200个，芯硅谷
￥86.90
粘性末端快速连接预混液：Rapid Sticky-end Ligase ProMix
询价
H3N2(A/Aichi/2/1968) HA expression plasmid,C-HA | 甲型流感H3N2(A/Aichi/2/1968) HA 蛋白表达质粒DNA,C-HA
￥1890
ZIKV(SPH2015) prM and E expression plasmid | 寨卡病毒(SPH2015) prM and E 蛋白表达质粒DNA
￥1890
关于丁香通
公司信息
个人用户
企业机构
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序