小鼠常规病理分析实验

实验分类：

实验动物

别名：

pathological diagnosis

最新修订时间：2022-02-10

简介

病理分析（pathological diagnosis）是表型分析中极为重要的一环，无论对于何种系统和组织，组织学上所反映出来的差异及缺陷通常最具有说服力，因此正确的组织采集和处理过程是病理分析的基础而重要的步骤，对病理切片的正确分析则需要由有经验的专业人员进行。

小鼠常规病理分析步骤一般包括：活体采血（可选）；麻醉（灌流用）；固定在解剖板上；开胸心脏灌流固定（可选）；取得完整的目的组织；组织称重（可选）；组织固定；冷冻或石蜡包埋切片；染色封片；观察分析。

来源：丁香实验团队

操作方法

灌流

灌流可以去除组织（尤其是脑组织）中血液对包埋切片的影响，保证大部分组织形态完好，而如果需要取组织提蛋白或提 RNA，则不能使用固定液，可选择生理盐水进行灌流或不灌流。

组织分离及固定

灌流后或不经过灌流的小鼠均可用于分离目标器官或组织。需要称重比较的组织，如心脏、脂肪、肝脏等，一般不经过灌流，保证组织的原始体积和重量，取材时应尽量完整而不黏附其他组织如心脏周围结缔组织，在冰冷的 PBS 中漂洗去掉组织上的多余血液或血块，在吸水纸上吸干多余水分后称量。固定时根据实际需要选择合适的固定液，比较常用的是溶解于 PBS 的 4％ PFA 或 10％中性甲醛，需要注意的是不同组织有不同

石蜡包埋切片

使用程序脱水包埋机（如 Leica ASP200S）可大量节省时间和操作过程中产生的不确定性，绝大多数组织只要大小修剪合适，经过常规设定程序的包埋都可以达到理想的脱水透蜡效果，对组织大小和完整性有特殊要求的，则推荐采用大量延长梯度脱水透明时间的手工脱水包埋来取得预期的透蜡效果。