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        神经系统免疫性疾病模型制作实验

        实验分类:

        生物化学实验

        最新修订时间:

        简介

        来源:《神经生物学实用实验技术》第四军医大学出版社

        来源:丁香实验

        操作方法

        ​实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型

        (1)免疫原的制备MOG35-55片段,其氨基酸序列为MEVGWYRSPFSRVVHLYRNGK,由公司合成(2)免疫方案包括:①第一次免疫(Od)异氟醚吸入麻醉下,MOG35-55:FCA(1:1)混合液4ml,百日咳杆菌菌液:PBS(1:50)混合液0.2ml于足垫处皮下注射;②第二次免疫(7d) 异氟醚吸入麻醉下,MOG35-55:FCA(1:1)混合液4ml,百日咳杆菌菌液:PBS(1:5

        ​实验性自身免疫性神经炎(EAN)模型

        (1) 周围神经髓鞘的制备自牛脊神经根提取周围神经髓磷脂(bovine peripheral mylin,BPM):①取牛硬脊膜内神经根,-70℃冻存;②室温融溶,剪碎,与0.3M蔗糖溶液混合,使用组织高速离散器制成5%(w/v)组织匀浆;③离心管中加入0.5M蔗糖溶液,再加入0.3M蔗糖组织匀浆(比例1:1),96000g,离心60min; ④收获界面(乳白色中间层),加入蒸馏水悬浮,96000

        实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)模型

        (1)免疫原的制备人工合成加利福尼亚电幔AchR-a的146-162序列片段作为免疫原,其氨基酸序列为Ala-Ile-Phe-Lys-Ser-Tyr-Cys-Glu-Ile-Ile-Val-Thr-His-Phe-Pro-Phe-Asp。(2)模型制备程序为:①将合成多肽20µg溶解于100µL的PBS缓冲液中(pH7.2),并加入等量的CFA,充分混合,直到水溶液完全被油滴吸附;②皮下注射接种于

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