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        脊髓机械性损伤模型的制作实验

        实验分类:

        生物化学实验

        最新修订时间:

        简介

        脊髓损伤动物模型,对研究脊髓损伤的病因、病理机制以及有效的干预治疗措施具有重要意义。应不同需要(模拟临床、获得稳定损伤结果),目前有多种脊髓损伤模型,包括钝挫伤(撞击、压迫伤等)、锐器损伤(切割、横断、半横断等)和其他非机械性损伤(化学、辐射、缺血等)。现有研究多采用机械性损伤模型。其中,撞击伤在临床最常见,涉及的损伤机制全面复杂,应用最广泛,如NYU和osu模型。为简化损伤机制和造成待续压迫损伤,压迫损伤模型也应用较多,包括重物压迫、气襄挤压、血管钳或摄子夹伤等。横断模型则多用于纤维再生研究。来源:《神经生物学实用实验技术》

        来源:丁香实验

        操作方法

        实验前的准备及暴露脊髓

        (1)1%戊巴比妥钠按40-60mg/kg腹腔麻醉动物。(2)以T10(椎体)为中心剃去背毛。(3)暴露T8椎板,行背侧中线30-40mm纵行切口,切开皮肤及皮下组织,用乳突撑开器背侧入路暴露T6-11节段椎板。(4) T8双侧椎板去除方法包括两种:①将T8两侧肋横关节分离开,剪开T9两侧上关节突,眼科镊夹持T8棘突轻轻向背侧提起,使T8.9椎体间隙稍扩大,经扩大的椎体间隙在椎管腔内紧贴椎板与脊髓

        大鼠脊髓NYU模型

        (1)固定暴露的脊髓吻尾椎板的棘突,使脊髓保持水平,下降撞击杆至刚接触脊髓并设为0位,上升撞击杆至实验高度(6.25,12.5,25,50mm),释放撞击杆,撞击完迅速提起撞击杆,同时从与仪器相连的计算机上读取撞击后的数据(如脊髓压缩比和压缩率)。逐层缝合肌肉皮肤。(2)NYU大鼠脊髓撞击仪可计算并记录撞击杆下落过程和脊髓受撞击情况的多种数据,如脊髓压缩比和压缩率,处于一定范围即可纳入实验,否则应

        大鼠脊髓挤压伤模型

        (1)动脉瘤夹夹伤选择弯曲弧度和厚度与造模用动脉瘤夹相近的分离钩,分离脊髓和腹侧椎管。夹子下臂伸入脊髓与腹侧椎管之间,上臂千脊髓背侧,迅速释放动脉瘤夹并保持一定时间(如1min)(见图4-2B),打开并移去动脉瘤夹。逐层缝合肌肉皮肤。(2)摄子夹伤摄子垂直于脊柱,两齿内侧分别紧贴脊髓两侧下降至镊子尖端触到腹侧椎管。缓慢匀速闭合摄子(如1s内)并保持一定时间(如15s)。释放摄子至闭合前宽度并移去。

        大鼠脊髓半横断模型

        (1)脊髓暴露后,用立体定向仪将大鼠固定,用自制刀片半横切大鼠脊髓T8节段(图4-5);(2)用11-0线缝合硬膜,然后用5-0线逐层缝合肌肉,皮下及皮肤。(3)结果判读大鼠切割伤模型,可通过后期矢状切片染色观察,半切是否完全。

        大鼠脊髓全横切模型

        ①脊髓暴露后,用立体定向仪将大鼠固定;②用显微外科摄将硬脊膜轻轻提起,用眼科剪将硬膜剪开;③再提起硬脊膜然后用三角针将11-0线从硬膜的腹侧面穿过;④用刀片横切大鼠脊髓T8节段,提起细线以验证脊髓全横断;⑤用11-0线缝合硬膜,然后用5-0线逐层缝合肌肉,皮下及皮肤。大鼠切割伤模型,可在实验过程中提起两断端硬膜观察是否横切完全,也可通过后期矢状切片染色验证横断是否完全。

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