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        酶在非孔玻璃表面的共价固定化实验

        实验分类:

        生物化学实验

        最新修订时间:

        简介

        由于玻璃对强酸和溶剂有抵抗能力,并且它具有紧密的固体结构,因此在技术过程方面成为了酶固定的有价值的材料。然而,严重的缺点是玻璃的惰性和较小的可接受表面。为了引入反应基到惰性玻璃表面,必须在固定反应之前硅烷化。


        来源:《酶学实验手册》

        来源:丁香实验

        操作方法

        基本方案

        1. 玻璃珠的活性玻璃珠(10 g)在 40 ml 5% 硝酸中 80~90℃ 加热 1 h。其后珠子用蒸馏水洗三次,并被转移到 PE 容器中避免硅烷化和酶固定到长颈瓶的壁上。添加水(10 ml)和 3 g 3-氨基丙基-三乙氧基硅烷,pH 先用浓 HCl 调节,最终用 2 mol/L 的 HCl 将 pH 调到 3~4,用 pH 指示纸来检测(pH 电极会被损坏)。反应的混合物在 65℃ 中孵化

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