生物化学实验

来源：《神经生物学实用实验技术》

来源：《神经生物学实用实验技术》

烟酰胺核苷酸可以作为脱氢酶的底物被测定（特别是 LDH，ADH 作用于 NAD＋ 和 G6PDH 作用于 NADP＋），根据各自的吸收系数可以利用酶循环的方法在低浓度下被测定。来源：《酶学实验手册》

来源：《神经生物学实用实验技术》

葡萄糖异构酶是应用最多的酶之一，本质上它是木糖异构酶而非葡萄糖异构酶。它从各种各样的微生物中分离得来，它在微生物体内作为木糖代谢物。半纤维素，像木聚糖或阿拉伯糖，是最丰富的自然营养物质之一，包含了世界上大约 40％ 的生物量。它由木聚糖酶裂解，木聚糖酶是由生物体分泌到基质中的外泌酶，能使多聚结构分裂成单糖单位像木糖，单糖单位可被细胞重新吸收并被木糖异构酶转化成木酮糖，木酮糖激酶通过激活 D-木酮糖

来源：《神经生物学实用实验技术》

来源：《神经生物学实用实验技术》

来源：《神经生物学实用实验技术》

此次介绍优先切割 Tyr、Trp、Phe、Leu 氨基酸后肽键的蛋白酶。来源：《酶学实验手册》

单纤维肌电图可以用于：更为敏感地检测神经肌肉接头传导异常。主要观测指标包括“颤抖”（jitter）和“阻滞”（blocking）。

来源：《神经生物学实用实验技术》

髓鞘是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜，即髓鞘由髓鞘细胞的细胞膜组成；目前研究注意髓鞘成分的抗原性，如：髓鞘碱性蛋白（MBP）、髓鞘相关醣蛋白（MAG）、髓鞘少突胶质细胞醣蛋白（MOG）等。

来源：《神经生物学实用实验技术》

脲＋H2O＋2 H＋→CO2＋2NH4＋含金属锌的酶。释放的 NH3 可以通过 pH 稳定计的辅助进行确定，也可以通过与谷氨酸脱氢酶相偶联的分光光度计法测定。《酶学实验手册》

此次介绍优先切割 Arg和 Lys 肽键的蛋白酶。来源：《酶学实验手册》

因为蛋白酶具有不同的种类和专一性。蛋白酶可以根据不同的标准进行细分。以催化机制分，有三种不同的类型：丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、金属-蛋白酶。以进攻底物的方式分为内、外蛋白酶。第三种标准是变化的底物的专一性，如胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶类的酶。对于适合的实验，必须考虑到这些划分。特别是当检测新的蛋白酶时，首先要决定的是，测试酶的高专一性还是鉴别蛋白质分裂活性的光谱范围。前者需要特殊的底物，而后者采用

α-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶，麦芽糖酶。从末端切断 α-D-葡萄糖的非还原的 1，4 键相连的 α-D-葡萄糖残基。对于实验，麦芽糖分成两个葡萄糖，这是从己糖激酶的反应中测得的，而己糖激酶（HK）的反应又与葡萄糖 6-磷酸脱氢酶（G6PDH）相偶联。来源：《酶学实验手册》

几乎所有神经细胞的培养必须有大分子物质作为生长基质，细胞黏附其上才能生长。常用的有多聚赖氨酸(polylysine)和多聚鸟氨酸(polyornithine)。此外还有一些细胞外基质(ECM)成分，如层黏连蛋白(laminin)、纤连蛋白(fibronectin)、胶原(collagen)等。来源：《神经生物学使用实验技术》

正磷酸单酯磷酸水解酶（最适碱度）。正磷酸单酯＋H2O → 醇＋Pi这个酶可以从各种渠道得来，如细菌和哺乳动物肠黏膜。每个酶分子有两个 Zn2＋离子键。碱性的磷酸酶频繁地与抗体配位，例如在 Westernblots 中及酶联免疫鉴定（ELISA）中。细菌酶的最适 pH 是 8.0，哺乳动物的要较高一点（9～10）。依照反应方案，以下的实验步骤用到了增加黄色的着色强度。对磷酸硝基苯＋H2O →对硝基酚

三酰甘油脂肪酶，三酰甘油酰基水解酶。三酰甘油 → 甘油 ＋ 长链脂肪酸游离羧基的释放引起 pH 的降低，而这可以用来鉴定酶的活性。在实验期间，为了保持一个稳定的 pH，建议 pH 稳定计与自动滴管连接，或者用从合成的底物上释放一个具有荧光的残基，根据其荧光光度测定活度。来源：《酶学实验手册》