利用位点特异的 DNA 重组方法诱发基因组的条件突变

实验分类：

其他实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

通过位点特异的D N A 重组改变完整细胞和有机体的基因组已经成为一种重要的基因转移方法。基因转移和同源重组引起的D N A 修饰一旦整合进目的基因组就不会再移动。与之相反，转移的D N A 片段如果包含外源重组酶目的序列，则可以进一步修饰之前发生变化的基因组结构，从而提高了基因转移的实用性，加强了实验的设计。
作者：T.弗里德曼等,译者：殷勤伟等，本实验来自「基因转移」

来源：丁香实验

操作方法

通过引入 ZoxP 转基因序列对基因组进行修饰

通过引入 ZoxP 转基因序列对基因组进行修饰材料试剂电泳级琼脂糖 2X 细胞冻存液（含 4 0 % D M E M 、 4 0 % 胎牛血清、 2 0% D M S O ) 50 X D enhardt 溶液 Ig 聚蔗糖（F ico ll， A m ersham Biosciences 17-0300-50) I g

体外 C re 重组酶基因的转移和位点依赖性重组的检测

体外 C re 重组酶基因的转移和位点依赖性重组的检测材料试剂更昔洛韦（2 mmol/L ; InvivoGen， sud-gcv) 小鼠： ZP3-C re 转基因鼠（Shafietal.2000) 寡核苷酸 Cre 正向引物（5’-CTGCATTACCGGTCGATGCA-3’）