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        荧光素原位杂交探测环境毒物导致的 染色体畸变和非整倍体实验

        实验分类:

        其他实验

        最新修订时间:

        简介

        很多化学试剂和不同性质的离子辐射能导致染色体完整性的损伤,造成染色体在有丝分裂和减数分裂中的分布异常。配以多种与不同 D N A 序列互补的探针,荧光素原位杂交技术已经用于探测和定量有丝分裂中期和间期细胞中的特定结构和数目畸变。针对特异性染色体完整序列的探针,可探测与细胞转化和肿瘤发展密切相关的分裂中期细胞中稳定的排列改变;能识别一个物种所有染色体着丝粒周边序列的探针,已用于区别有着丝粒的微核和不含着丝粒的微核,并在此基础上,进一步推断它们是否由染色体丟失或断裂造成。反过来,识别特定染色体着丝粒周边序列的探针,可以通过计数分裂间期
        核中染色体的数目,发现可能由于染色体不分裂产生的超倍体细胞。最终,与所有染色体共有端粒序列杂交的探针,可被用于标记端粒并量化它们的个数和平均长度,而这些细胞参数近来被认为与基因不稳定性相关。所有这些技术都是基于突光素杂交的基本原理 ,加上一些特定的调整。
        作者:马丁,本实验来自「环境基因组学实验指南」

        来源:丁香实验

        操作方法

        荧光素原位杂交探测环境毒物导致的 染色体畸变和非整倍体实验

        一、材料 1 玻片制备及材料固定 (1)干净的玻片。 (2)甲醇 -乙 酸 溶 液(3 : 1) 2 玻片上材料的预处理 3 靶和探针的变性 (1)变 性 溶 液(70% 甲酰胺-2X SSC) : 按 配 制 50m L 溶 液 ,加 人 35m L 去离子甲酰胺(K o d a k, Rochester, N Y ), 5m L 蒸

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