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        蛋白芯片技术

        实验分类:

        免疫学实验

        别名:

        protein chip technology,protein microarray

        最新修订时间:

        简介

        蛋白芯片技术,也称蛋白质微阵列(protein microarray),是一种高通量的蛋白分析技术,不仅可以在蛋白质水平上检测基因的表达,用于蛋白质表达谱研究;还可以大规模研究抗原-抗体及其他各种蛋白质-蛋白质的相互作用,以及DNA-蛋白质、RNA-蛋白质的相互作用。目前,用于蛋白芯片技术的方法主要有1种:主要包括芯片制作、样品准备、生物化学反应、检测分析的步骤。

        原理

        蛋白质芯片技术的基本原理是指将不同的蛋白质或多肽分子显微固化于固相支持物表面,进一步标记样品中的蛋白质,通过检测蛋白质-蛋白质相互作用,对样品中靶蛋白分子进行高通量检测的一种新技术。


        其基本原理是蛋白质-蛋白质相互作用,如抗原-抗体、受体-配体、酶与底物等之间的特异识别与结合。相对而言,这种相互作用的特异性不如碱基之间的互补配对严格。此外,蛋白质芯片还可以通过蛋白质与双链 DNA 的相互作用来检测靶 DNA分子与靶蛋白之间的相互作用。

        应用

        蛋白质芯片技术的常用应用领域如下:


        (一)基础研究应用


        来检测特异的蛋白质表达,同时还可以用来鉴定蛋白质间的相互作用、蛋白质修饰、DNA-蛋白质间的相互作用、小分子-蛋白质间的相互作用及抗体检测,其中最重要的应用仍然是蛋白差异表达分析。


        例如以夹心ELISA法为基础的蛋白质微阵列,可用来检测细胞因子蛋白的表达,通过高效的检测试剂来筛选大量待检样品,具有较好的敏感性和特异性。而随着质谱技术的应用,通过对探针结合的蛋白质分析后,可以得到不同的样品表达图谱。


        而在研究小分子分蛋白质间相互作用研究方面,可以通过将小分子固化于芯片上,与标记的蛋白共同孵育,或是应用标记的小分子去筛选蛋白质芯片上的蛋白质,从而揭示蛋白质潜在的靶分子位点。


        (二)疾病诊断


        蛋白质芯片通过检测多种肿瘤标记物,来为肿瘤诊断提供新的研究工具。


        (三)食品分析


        利用免疫检测的蛋白质芯片技术,可用于检测食品中的黄曲霉毒素、雌激素。

        来源:丁香实验团队

        操作方法

        蛋白芯片技术

        蛋白芯片技术,也称蛋白质微阵列(protein microarray),是一种高通量的蛋白分析技术。

        🔥 固相抗体芯片

        采用 Western Blotting,简称 WB,来检测蛋白表达水平在基础研究中最为常见。当面临多样本,或蛋白筛选工作时,这种传统方法会显得力不从心,需要大量的时间成本。固相抗体芯片的设计和开发在很大程度上弥补了 WB 耗时长,单次检测样本少的缺点。它在细胞因子、分子通路等高通量筛选中发挥着极大的优势。

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